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A. blunt ends में complementary overhang नहीं होता/Blunt ends lack complementary overhang
Explanation
Simple Explanation
Sticky ends complementary pairing से पास आते हैं। Blunt ends में यह सहायता नहीं होती। / Sticky ends come together by complementary pairing. Blunt ends do not have this help.
A. जब complementary overhang मौजूद न हों/When complementary overhangs are absent
Explanation
Simple Explanation
Blunt ends में overhang नहीं होते इसलिए base pairing सहायता नहीं मिलती। इससे ligation तुलनात्मक रूप से कठिन हो सकती है। / Blunt ends lack overhangs so base pairing support is absent. This can make ligation comparatively harder.
Ligase recombinant DNA बनाता है और फिर उसे host cell में डाला जा सकता है। यह process transformation कहलाती है। / Ligase makes recombinant DNA and then it can be introduced into a host cell. This process is called transformation.
D. host cell में transformation/Transformation into a host cell
Explanation
Simple Explanation
लाइगेशन के बाद recombinant plasmid host cell में डाला जा सकता है। इस प्रक्रिया को transformation कहा जाता है। / After ligation the recombinant plasmid can be introduced into a host cell. This process is called transformation.
A. ligation efficiency घट सकती है/Ligation efficiency can decrease
Explanation
Simple Explanation
Excess salts ligase और DNA end interaction को affect कर सकते हैं। Purification और wash step जरूरी हैं। / Excess salts can affect ligase and DNA end interaction. Purification and wash step are necessary.
A. insert-vector ratio सही रखने के लिए/To keep insert-vector ratio correct
Explanation
Simple Explanation
Ligation setup में fragment amount और molar ratio important हैं। Quantification cloning efficiency सुधारती है। / Fragment amount and molar ratio are important in ligation setup. Quantification improves cloning efficiency.
A. ligated DNA को फिर cut कर सकता है/It can cut ligated DNA again
Explanation
Simple Explanation
Active restriction enzyme newly ligated DNA को काट सकता है। इसलिए inactivation या purification use करें। / Active restriction enzyme can cut newly ligated DNA. Therefore use inactivation or purification.
A. compete करके unwanted products बना सकते हैं/They can compete and form unwanted products
Explanation
Simple Explanation
Unwanted fragments ligation reaction में interfere कर सकते हैं। Purification specific desired fragments रखती है। / Unwanted fragments can interfere in ligation reaction. Purification keeps specific desired fragments.
A. multiple inserts या inefficient cloning risk/Risk of multiple inserts or inefficient cloning
Explanation
Simple Explanation
Excess insert abnormal ligation products बढ़ा सकता है। Suitable ratio use करें। / Excess insert can increase abnormal ligation products. Use a suitable ratio.
A. ligation efficiency घट सकती है/Ligation efficiency can decrease
Explanation
Simple Explanation
Salt carryover ligase reaction को प्रभावित कर सकता है। Final wash और drying सही करें। / Salt carryover can affect ligase reaction. Do final wash and drying properly.
A. recovery और quantification कठिन हो सकती है/Recovery and quantification can be difficult
Explanation
Simple Explanation
छोटे fragments gel extraction में खो सकते हैं। Accurate amount estimate भी कठिन हो सकता है। / Small fragments can be lost during gel extraction. Accurate amount estimation can also be difficult.
Active restriction enzyme ligation mix में newly joined DNA को काट सकता है। Cleanup या inactivation useful है। / Active restriction enzyme can cut newly joined DNA in ligation mix. Cleanup or inactivation is useful.
A. contaminants या wrong DNA ratio/Contaminants or wrong DNA ratio
Explanation
Simple Explanation
Compatible ends के अलावा clean DNA और सही ratio जरूरी है। Salt ethanol या enzyme carryover ligation रोक सकते हैं। / Besides compatible ends clean DNA and correct ratio are necessary. Salt ethanol or enzyme carryover can block ligation.
A. vector ends का insert बिना आपस में जुड़ना/Vector ends joining each other without insert
Explanation
Simple Explanation
Self-ligation empty vector colonies दे सकती है। Dephosphorylation या directional cloning इसे घटाती है। / Self-ligation can give empty vector colonies. Dephosphorylation or directional cloning reduces it.
A. buffer enzyme और small fragments हटाने के लिए/To remove buffer enzyme and small fragments
Explanation
Simple Explanation
Purification ligation inhibitors कम करती है। Clean vector ends recombinant DNA formation में मदद करते हैं। / Purification reduces ligation inhibitors. Clean vector ends help recombinant DNA formation.
Compatible clean ends ligase को joining में मदद करते हैं। Impurities ligation को रोक सकती हैं। / Compatible clean ends help ligase in joining. Impurities can block ligation.
A. hybrid compatible ends का जुड़ना/Joining of hybrid compatible ends
Explanation
Simple Explanation
अलग enzymes के compatible ends जुड़कर नया hybrid sequence बना सकते हैं। इससे original site वापस नहीं बनती। / Compatible ends from different enzymes can join to form a new hybrid sequence. Thus the original site is not restored.
A. digest compatible ends बनाता है जिन्हें ligase जोड़ता है/Digest makes compatible ends that ligase joins
Explanation
Simple Explanation
Cutting के बाद DNA ends तयार होते हैं। Ligase उन्हीं ends को जोड़कर recombinant DNA बनाता है। / After cutting DNA ends are prepared. Ligase joins those ends to make recombinant DNA.
A. contaminants ligase activity रोक सकते हैं/Contaminants can inhibit ligase activity
Explanation
Simple Explanation
Salt ethanol phenol या enzymes ligation में बाधा डाल सकते हैं। Clean DNA ends बेहतर joining देते हैं। / Salt ethanol phenol or enzymes can interfere with ligation. Clean DNA ends give better joining.
A. दो अलग incompatible vector ends बनाकर/By creating two different incompatible vector ends
Explanation
Simple Explanation
Different ends vector को same orientation में close होने से रोक सकते हैं। Insert correct orientation में लग सकता है। / Different ends can prevent the vector from closing in the same orientation. Insert can join in correct orientation.
A. single enzyme sticky ends compatible हों/Single enzyme sticky ends are compatible
Explanation
Simple Explanation
Same compatible ends vector को खुद से ligate कर सकते हैं। Dephosphorylation या directional cloning इसे घटा सकती है। / Same compatible ends can let vector ligate to itself. Dephosphorylation or directional cloning can reduce this.
A. उनमें complementary overhang नहीं होता/They lack complementary overhang
Explanation
Simple Explanation
Blunt ends में sticky base pairing support नहीं होता। इसलिए ligation efficiency कम हो सकती है। / Blunt ends lack sticky base pairing support. Therefore ligation efficiency can be lower.
A. enzyme buffer और small fragments हटाने के लिए/To remove enzyme buffer and small fragments
Explanation
Simple Explanation
Purification ligation inhibitors को कम कर सकती है। Clean compatible ends better ligation देते हैं। / Purification can reduce ligation inhibitors. Clean compatible ends give better ligation.
A. DNA ligase तभी efficient joining कर पाएगा/DNA ligase can then join efficiently
Explanation
Simple Explanation
Compatible ends base pairing और ligation को आसान बनाते हैं। Incompatible ends cloning failure दे सकते हैं। / Compatible ends make base pairing and ligation easier. Incompatible ends can cause cloning failure.
Alkaline phosphatase vector ends से phosphate हटाकर self-ligation घटा सकता है। यह cloning efficiency में मदद करता है। / Alkaline phosphatase removes phosphate from vector ends and can reduce self-ligation. This helps cloning efficiency.
A. DNA ends ठीक से नहीं जुड़ेंगे/DNA ends will not join properly
Explanation
Simple Explanation
Inactive ligase phosphodiester bond नहीं बना पाएगा। इसलिए recombinant DNA formation कम या बंद हो सकती है। / Inactive ligase cannot form phosphodiester bonds. Therefore recombinant DNA formation may decrease or stop.
Screening marker recombinants की पहचान में मदद करता है। lacZ based blue-white screening इसका example है। / A screening marker helps identify recombinants. lacZ-based blue-white screening is an example.
A. Screening marker या restriction analysis से/By screening marker or restriction analysis
Explanation
Simple Explanation
Screening marker या restriction analysis insert की presence दिखा सकते हैं। इससे recombinant पहचान आसान होती है। / A screening marker or restriction analysis can show insert presence. This makes recombinant identification easier.
A. ligase activity inhibit कर सकता है/It can inhibit ligase activity
Explanation
Simple Explanation
Residual ethanol downstream enzyme reactions को रोक सकता है। DNA pellet या column membrane को dry करें। / Residual ethanol can inhibit downstream enzyme reactions. Dry the DNA pellet or column membrane.
Uncut vector transform होकर background दे सकता है। Complete digestion और gel purification इसे घटाते हैं। / Uncut vector can transform and give background. Complete digestion and gel purification reduce it.
A. Salts और enzymes cells को affect कर सकते हैं/Salts and enzymes can affect cells
Explanation
Simple Explanation
Ligation mix में salts या enzymes हो सकते हैं। कुछ cases में clean-up transformation efficiency सुधार सकता है। / A ligation mix can contain salts or enzymes. In some cases clean-up can improve transformation efficiency.
C. Salts या enzymes cells को stress कर सकते हैं/Salts or enzymes can stress cells
Explanation
Simple Explanation
Ligation mixture में salts और enzymes हो सकते हैं जो cells को affect करें। Clean-up कुछ cases में मदद कर सकता है। / A ligation mixture can contain salts and enzymes that affect cells. Clean-up can help in some cases.
A. Vector insert के बिना बंद होकर marker रख सकता है/Vector can close without insert and still carry marker
Explanation
Simple Explanation
Self-ligated vector antibiotic marker रख सकता है पर desired insert नहीं होता। इसलिए screening जरूरी है। / A self-ligated vector can keep the antibiotic marker but lacks desired insert. Therefore screening is needed.
Vector ends से phosphate हटाने पर self-ligation घट सकती है। यह background colonies कम करने में मदद करता है। / Removing phosphate from vector ends can reduce self-ligation. This helps reduce background colonies.
DNA ends compatible हों तो ligation आसान हो सकती है। Incompatible ends joining को कठिन बना सकते हैं। / If DNA ends are compatible ligation can be easier. Incompatible ends can make joining difficult.
A. insert orientation control हो सकता है/Insert orientation can be controlled
Explanation
Simple Explanation
Directional cloning insert को desired orientation में जोड़ने में मदद करती है। Ligase फिर सही ends को स्थायी रूप से जोड़ता है। / Directional cloning helps join the insert in the desired orientation. Ligase then permanently joins the correct ends.
A. insert के पास सही phosphate ends हों/Insert has proper phosphate ends
Explanation
Simple Explanation
Dephosphorylated vector self-ligation घटाता है लेकिन proper insert ends ligation में मदद करते हैं। Chemical ends का ध्यान जरूरी है। / Dephosphorylated vector reduces self-ligation but proper insert ends help ligation. Chemical ends must be considered.
Alkaline phosphatase vector ends से phosphate हटा सकता है। इससे vector self-ligation कम हो सकती है। / Alkaline phosphatase can remove phosphate from vector ends. This can reduce vector self-ligation.
Blunt ends में complementary overhang नहीं होता। इसलिए sticky ends की तरह initial pairing support नहीं मिलता। / Blunt ends do not have complementary overhangs. Therefore they lack initial pairing support like sticky ends.
A. ligation के बाद recombinant DNA host cell में जा सकता है/After ligation recombinant DNA can enter a host cell
Explanation
Simple Explanation
Ligation recombinant DNA बनाता है और transformation उसे host cell में ले जा सकता है। यह cloning workflow में क्रमिक steps हैं। / Ligation makes recombinant DNA and transformation can take it into a host cell. They are sequential steps in cloning workflow.
Missing 5 prime phosphate phosphodiester bond formation को रोक सकता है। बाकी options ligation में मदद करते हैं। / Missing 5 prime phosphate can prevent phosphodiester bond formation. The other options help ligation.
A. 5 prime phosphate हटने से vector अपने ends आसानी से नहीं जोड़ पाएगा/Removal of 5 prime phosphate makes vector ends less able to join themselves
Explanation
Simple Explanation
5 prime phosphate हटने पर vector self-ligation कम हो सकती है। यह cloning में unwanted background घटाने की strategy है। / Removing 5 prime phosphate can reduce vector self-ligation. This is a strategy to reduce unwanted background in cloning.
A. desired recombinant plasmid कम बन सकते हैं/Fewer desired recombinant plasmids may form
Explanation
Simple Explanation
Insert कम होने पर vector के साथ desired joining की संभावना घट सकती है। cloning में insert amount important factor है। / If insert is low the chance of desired joining with vector may decrease. Insert amount is an important factor in cloning.
A. यह vector को insert के बिना बंद कर सकता है/It can close vector without insert
Explanation
Simple Explanation
Self-ligation में vector अपने ही सिरों से जुड़ जाता है। इससे desired insert वाला recombinant plasmid नहीं बनता। / In self-ligation the vector joins its own ends. This does not make the desired recombinant plasmid with insert.
Ligated recombinant DNA को host cell में introduce किया जा सकता है। यह transformation step हो सकता है। / Ligated recombinant DNA can be introduced into a host cell. This can be the transformation step.
A. bond formation प्रभावित हो सकती है/Bond formation may be affected
Explanation
Simple Explanation
Ligase को phosphodiester bond बनाने के लिए ऊर्जा चाहिए। ऊर्जा स्रोत न हो तो ligation कमजोर हो सकती है। / Ligase needs energy to form a phosphodiester bond. Without an energy source ligation can be weak.
Ligation के लिए active ligase proper DNA ends और suitable buffer जरूरी हैं। Photosynthesis pigment का ligation से संबंध नहीं है। / Ligation needs active ligase proper DNA ends and suitable buffer. Photosynthesis pigment is not related to ligation.
A. compatible sticky ends मौजूद हों/Compatible sticky ends are present
Explanation
Simple Explanation
Compatible sticky ends पहले base pairing कर सकते हैं। इससे लाइगेज द्वारा joining अधिक प्रभावी हो सकती है। / Compatible sticky ends can base pair first. This can make joining by ligase more effective.
D. enzyme activity में सहायक cofactor के रूप में/As a helper cofactor for enzyme activity
Explanation
Simple Explanation
कई ligation reactions में magnesium ion enzyme activity में सहायक हो सकता है। इसलिए buffer composition महत्वपूर्ण है। / In many ligation reactions magnesium ion can help enzyme activity. Therefore buffer composition is important.
C. यह पाँच प्राइम फॉस्फेट से जुड़कर backbone पूरा करता है/It joins with 5 prime phosphate to complete the backbone
Explanation
Simple Explanation
तीन प्राइम ओएच और पाँच प्राइम फॉस्फेट के बीच फॉस्फोडाइएस्टर बंध बनता है। इसी से डीएनए रीढ़ पूरी होती है। / A phosphodiester bond forms between 3 prime OH and 5 prime phosphate. This completes the DNA backbone.
A. कटे vector से पाँच प्राइम फॉस्फेट हटाकर/By removing 5 prime phosphate from cut vector
Explanation
Simple Explanation
Vector ends से पाँच प्राइम फॉस्फेट हटाने पर self-ligation घट सकती है। परीक्षा में phosphate removal को ligation control से जोड़ें। / Removing 5 prime phosphate from vector ends can reduce self-ligation. In exams link phosphate removal with ligation control.
D. दो अलग restriction enzymes से अलग सिरे बनाना/Making different ends with two restriction enzymes
Explanation
Simple Explanation
दो अलग सिरे vector के अपने आप जुड़ने की संभावना घटा सकते हैं। यह directional cloning में उपयोगी है। / Two different ends can reduce the chance of vector self-joining. This is useful in directional cloning.
C. कटे vector का अपने ही सिरों से जुड़ना/Cut vector joining with its own ends
Explanation
Simple Explanation
Self-ligation में vector insert के बिना अपने सिरों से जुड़ जाता है। cloning में यह अनचाहा परिणाम हो सकता है। / In self-ligation the vector joins its own ends without insert. This can be an unwanted result in cloning.
A. vector insert के बिना जुड़ सकता है/Vector can join without insert
Explanation
Simple Explanation
Self-ligation में vector अपने ही ends जोड़ सकता है। इससे desired recombinant plasmid नहीं बनता। / In self-ligation the vector can join its own ends. This does not form the desired recombinant plasmid.
A. enzyme के लिए suitable pH और salts देना/Providing suitable pH and salts for the enzyme
Explanation
Simple Explanation
Buffer ligase activity के लिए सही environment देता है। Wrong buffer ligation efficiency घटा सकता है। / Buffer gives the right environment for ligase activity. Wrong buffer can reduce ligation efficiency.
A. complementary overhang absent होता है/Complementary overhang is absent
Explanation
Simple Explanation
Blunt ends में overhang नहीं होता इसलिए initial base pairing support कम होता है। इसलिए ligation less efficient हो सकती है। / Blunt ends lack overhangs so initial base pairing support is low. Therefore ligation can be less efficient.
A. complementary overhangs present हों/Complementary overhangs are present
Explanation
Simple Explanation
Complementary overhangs sticky ends को पहले pair करने देते हैं। Active ligase फिर permanent bond बनाता है। / Complementary overhangs allow sticky ends to pair first. Active ligase then makes a permanent bond.
DNA ligase vector और insert के DNA backbone में phosphodiester bond बनाता है। यह stable recombinant DNA बनाता है। / DNA ligase forms a phosphodiester bond in the DNA backbone of vector and insert. This makes stable recombinant DNA.
A. अधिक उपयुक्त ligase conditions/More suitable ligase conditions
Explanation
Simple Explanation
Blunt ends में overhang नहीं होता इसलिए joining कठिन हो सकती है। Suitable conditions ligation में मदद कर सकती हैं। / Blunt ends lack overhangs so joining can be difficult. Suitable conditions can help ligation.
A. compatible sticky ends हों/Compatible sticky ends are present
Explanation
Simple Explanation
Compatible sticky ends base pairing के कारण आसानी से पास आते हैं। इससे ligation efficiency बढ़ सकती है। / Compatible sticky ends come together easily due to base pairing. This can increase ligation efficiency.
A. कटे vector से phosphate हटाने के लिए/To remove phosphate from cut vector
Explanation
Simple Explanation
Vector ends से phosphate हटाने पर self-ligation घट सकती है। फिर insert के सही phosphate ends ligation में मदद करते हैं। / Removing phosphate from vector ends can reduce self-ligation. Correct phosphate ends on insert then help ligation.
A. दो अलग restriction enzymes से अलग सिरे बनाना/Making different ends with two restriction enzymes
Explanation
Simple Explanation
दो अलग ends vector के अपने आप जुड़ने की संभावना घटा सकते हैं। यह directional cloning में उपयोगी है। / Two different ends can reduce the chance of vector self-joining. This is useful in directional cloning.
A. कटे vector का अपने ही सिरों से जुड़ जाना/Joining of cut vector ends with itself
Explanation
Simple Explanation
Self-ligation में vector insert के बिना अपने ही ends से जुड़ सकता है। Cloning में यह unwanted result हो सकता है। / In self-ligation a vector can join its own ends without insert. This can be an unwanted result in cloning.
A. compatible ends active ligase और energy source/Compatible ends active ligase and energy source
Explanation
Simple Explanation
Ligation के लिए compatible ends active ligase और energy source जरूरी होते हैं। ये conditions permanent joining में मदद करते हैं। / Ligation needs compatible ends active ligase and an energy source. These conditions help permanent joining.
A. लाइगेशन प्रभावित हो सकती है/Ligation may be affected
Explanation
Simple Explanation
5 prime phosphate phosphodiester bond बनाने के लिए जरूरी होता है। इसकी कमी ligation efficiency घटा सकती है। / 5 prime phosphate is needed to form a phosphodiester bond. Its absence can reduce ligation efficiency.
A. सक्रिय लाइगेज और अनुकूल डीएनए सिरे/Active ligase and compatible DNA ends
Explanation
Simple Explanation
Successful ligation के लिए active enzyme और सही DNA ends जरूरी हैं। Energy source भी ligase action में मदद करता है। / Successful ligation needs active enzyme and proper DNA ends. An energy source also helps ligase action.
Complementary sticky ends base pairing कर सकते हैं। DNA ligase फिर permanent bond बनाता है। / Complementary sticky ends can base pair. DNA ligase then forms a permanent bond.
A. DNA fragments और vector ends तैयार करना/Preparing DNA fragments and vector ends
Explanation
Simple Explanation
DNA cutting से insert और vector compatible रूप में तैयार किए जाते हैं। इसके बाद ligation step आता है। / DNA cutting prepares insert and vector in compatible form. Ligation comes after this step.
A. कटे हुए डीएनए सिरों को जोड़ना/Joining cut DNA ends
Explanation
Simple Explanation
लाइगेशन में लाइगेज की मदद से डीएनए सिरों को जोड़ा जाता है। यह पुनर्संयोजित डीएनए बनाने में जरूरी है। / In ligation DNA ends are joined with the help of ligase. It is essential for making recombinant DNA.
A. cut vector और insert को ligase से जोड़कर/By joining cut vector and insert with ligase
Explanation
Simple Explanation
Restriction digestion compatible ends बनाता है। DNA ligase इन्हें जोड़कर recombinant DNA बनाता है। / Restriction digestion creates compatible ends. DNA ligase joins them to make recombinant DNA.
A. planned fragments और compatible ends पाने के लिए/To obtain planned fragments and compatible ends
Explanation
Simple Explanation
Recombinant DNA में insert और vector को planned way में तैयार करना होता है। Predictable cutting cloning success बढ़ाती है। / In recombinant DNA insert and vector must be prepared in a planned way. Predictable cutting increases cloning success.
A. insert और vector को compatible बनाना/Making insert and vector compatible
Explanation
Simple Explanation
Cutting insert और vector को ऐसे ends देता है जो जुड़ सकते हैं। इसके बाद ligation step आता है। / Cutting gives insert and vector ends that can join. Ligation follows this step.
A. क्योंकि cloning के लिए DNA source चाहिए/Because a DNA source is needed for cloning
Explanation
Simple Explanation
Recombinant DNA work में gene या DNA fragment पहले प्राप्त करना होता है। इसलिए DNA isolation शुरुआती step है। / In recombinant DNA work the gene or DNA fragment must first be obtained. Therefore DNA isolation is an initial step.
A. ligation efficiency घट सकती है/Ligation efficiency may decrease
Explanation
Simple Explanation
5 prime phosphate phosphodiester bond formation के लिए जरूरी है। इसकी कमी ligation को प्रभावित कर सकती है। / 5 prime phosphate is needed for phosphodiester bond formation. Its absence can affect ligation.
D. पूरक उभार नहीं होता/There is no complementary overhang
Explanation
Simple Explanation
मंद सिरों में overhang नहीं होता इसलिए पहले base pairing सहायता नहीं मिलती। इसलिए joining कठिन हो सकती है। / Blunt ends lack overhangs so initial base pairing support is absent. Therefore joining can be harder.
C. पूरक उभार पहले base pairing कर सकते हैं/Complementary overhangs can base pair first
Explanation
Simple Explanation
चिपचिपे सिरों में पूरक उभार होते हैं जो पहले अस्थायी रूप से जुड़ सकते हैं। फिर लाइगेज उन्हें स्थायी बनाता है। / Sticky ends have complementary overhangs that can pair temporarily first. Then ligase makes them permanent.
B. एंजाइम को सही पीएच और आयनिक दशाएँ देना/Giving proper pH and ionic conditions to the enzyme
Explanation
Simple Explanation
बफर लाइगेज को सही प्रतिक्रिया वातावरण देता है। गलत बफर लाइगेशन दक्षता घटा सकता है। / Buffer gives ligase the proper reaction environment. Wrong buffer can reduce ligation efficiency.
A. ताकि लाइगेज उनके बीच बंध बना सके/So ligase can form a bond between them
Explanation
Simple Explanation
Ligase adjacent DNA ends के बीच bond बनाता है। दूर या असंगत ends ligation को कठिन बनाते हैं। / Ligase forms a bond between adjacent DNA ends. Distant or incompatible ends make ligation difficult.
A. लाइगेज की बंध बनाने वाली क्रिया के लिए/For bond-forming action of ligase
Explanation
Simple Explanation
लाइगेज को नया फॉस्फोडाइएस्टर बंध बनाने के लिए ऊर्जा चाहिए। इसलिए ligation buffer में ऊर्जा स्रोत होता है। / Ligase needs energy to make a new phosphodiester bond. Therefore ligation buffer contains an energy source.
A. डीएनए सिरे अनुकूल हों और लाइगेज सक्रिय हो/DNA ends are compatible and ligase is active
Explanation
Simple Explanation
सफल ligation के लिए compatible DNA ends और active ligase जरूरी हैं। गलत conditions से joining कम हो सकती है। / Successful ligation needs compatible DNA ends and active ligase. Wrong conditions can reduce joining.
लाइगेज फॉस्फोडाइएस्टर बंध बनाकर डीएनए की शर्करा-फॉस्फेट रीढ़ को पूरा करता है। यही स्थायी joining है। / Ligase completes the sugar-phosphate backbone of DNA by forming a phosphodiester bond. This is permanent joining.
A. नया फॉस्फोडाइएस्टर बंध बनाने के लिए/To form a new phosphodiester bond
Explanation
Simple Explanation
लाइगेज को नया covalent बंध बनाने के लिए ऊर्जा चाहिए। ऊर्जा स्रोत एटीपी या एनएडी प्लस हो सकता है। / Ligase needs energy to form a new covalent bond. The energy source can be ATP or NAD plus.
लाइगेशन में फाइव प्राइम फॉस्फेट और थ्री प्राइम हाइड्रॉक्सिल जरूरी होते हैं। इनके बीच नया फॉस्फोडाइएस्टर बंध बनता है। / In ligation 5 prime phosphate and 3 prime hydroxyl are required. A new phosphodiester bond forms between them.
A. पूरक उभार नहीं होता/There is no complementary overhang
Explanation
Simple Explanation
मंद सिरों में एकल तंतु उभार नहीं होता। इसलिए वे पहले से आधार युग्मन द्वारा आसानी से नहीं टिकते। / Blunt ends do not have single-stranded overhangs. Therefore they do not hold easily by base pairing first.
A. चिपचिपे सिरों में पूरक आधार युग्मन होता है/Sticky ends show complementary base pairing
Explanation
Simple Explanation
चिपचिपे सिरे पहले पूरक आधारों से अस्थायी रूप से जुड़ सकते हैं। इससे लाइगेज का जोड़ना आसान हो जाता है। / Sticky ends can first pair temporarily by complementary bases. This makes joining by ligase easier.
A. डीएनए खंडों को जोड़ने की प्रक्रिया/Process of joining DNA fragments
Explanation
Simple Explanation
लाइगेशन में डीएनए खंड लाइगेज की सहायता से जोड़े जाते हैं। यह क्लोनिंग में insert को vector से जोड़ता है। / In ligation DNA fragments are joined with the help of ligase. It connects the insert with the vector in cloning.
B. वे recognition site से दूर और कम predictable जगह काट सकते हैं/They may cut far from recognition site and less predictably
Explanation
Simple Explanation
Cloning में predictable cut जरूरी होता है। इसलिए Type II enzymes अधिक उपयोगी माने जाते हैं। / A predictable cut is needed in cloning. Therefore Type II enzymes are considered more useful.
A. recombinant ligation chance बढ़ाने के लिए/To increase chance of recombinant ligation
Explanation
Simple Explanation
सही insert-vector ratio recombinant clones बढ़ा सकता है। बहुत गलत ratio cloning efficiency घटा सकता है। / Correct insert-vector ratio can increase recombinant clones. A very wrong ratio can reduce cloning efficiency.
A. ligation या recombinant DNA formation/Ligation or recombinant DNA formation
Explanation
Simple Explanation
DNA fragments को ligase से जोड़कर recombinant DNA बनाया जाता है। फिर इसे host में introduce किया जाता है। / DNA fragments are joined by ligase to make recombinant DNA. Then it is introduced into a host.
A. टाइप द्वितीय प्रतिबंध एंजाइम/Type II restriction enzymes
Explanation
Simple Explanation
टाइप द्वितीय एंजाइम सामान्यतः विशिष्ट स्थान पर डीएनए काटते हैं। परीक्षा में इन्हें cloning-friendly enzymes मानें। / Type II enzymes generally cut DNA at specific sites. In exams treat them as cloning-friendly enzymes.
Screening methods insert presence identify करती हैं। Selection केवल vector uptake दिखा सकती है। / Screening methods identify insert presence. Selection may only show vector uptake.
A. Screening या molecular confirmation/Screening or molecular confirmation
Explanation
Simple Explanation
Selection केवल vector uptake दिखा सकती है। Insert confirmation के लिए PCR digest या sequencing उपयोगी हैं। / Selection may only show vector uptake. PCR digest or sequencing are useful for insert confirmation.
Protease-deficient host protein degradation कम कर सकता है। Expression experiments में यह उपयोगी होता है। / A protease-deficient host can reduce protein degradation. It is useful in expression experiments.
B. Transformed colony isolate करके/By isolating a transformed colony
Explanation
Simple Explanation
एक transformed colony में recombinant plasmid हो सकता है। Colony isolation clone selection का basic step है। / A transformed colony may contain a recombinant plasmid. Colony isolation is a basic step of clone selection.
Selection medium vector-containing cells को बनाए रखने में मदद करता है। इससे recombinant plasmid loss कम हो सकता है। / Selection medium helps maintain vector-containing cells. This can reduce recombinant plasmid loss.
B. Selection और screening से/By selection and screening
Explanation
Simple Explanation
Selection transformed cells चुनती है और screening recombinant clones पहचानती है। दोनों cloning workflow में महत्वपूर्ण हैं। / Selection chooses transformed cells and screening identifies recombinant clones. Both are important in cloning workflow.
E coli recombinant protein expression और plasmid cloning दोनों में common host है। Expression के लिए सही vector और conditions चाहिए। / E coli is common in recombinant protein expression and plasmid cloning. Expression needs proper vector and conditions.
lacZ जैसा screening marker recombinants और non-recombinants में अंतर दिखा सकता है। इससे पहचान तेज होती है। / A screening marker like lacZ can distinguish recombinants and non-recombinants. This speeds up identification.
DNA sequencing insert identity और orientation confirm कर सकती है। इसलिए यह final confirmation के लिए मजबूत method है। / DNA sequencing can confirm insert identity and orientation. Therefore it is a strong method for final confirmation.
A. Vector में desired insert confirm हो/Desired insert is confirmed in vector
Explanation
Simple Explanation
Recombinant vector में desired insert मौजूद होना चाहिए। Confirmation restriction analysis या sequencing से की जा सकती है। / A recombinant vector must contain the desired insert. Confirmation can be done by restriction analysis or sequencing.
