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A. Transformed कोशिकाएँ चुनना कठिन होगा/Selecting transformed cells will be difficult
Explanation
Simple Explanation
Ori replication में मदद करता है लेकिन marker selection के लिए चाहिए। Marker न होने पर transformed cells पहचानना कठिन है। / Ori helps replication but a marker is needed for selection. Without a marker transformed cells are difficult to identify.
B. वेक्टर होस्ट कोशिका में अपनी प्रतिकृतियाँ नहीं बना पाएगा/The vector will not replicate in the host cell
Explanation
Simple Explanation
ori (origin of replication) वह अनुक्रम है जहाँ से वेक्टर की प्रतिकृति बनना शुरू होती है। मार्कर जीन चयन में सहायता कर सकता है, लेकिन ori के बिना वेक्टर होस्ट कोशिका में स्थिर रूप से प्रतिकृति नहीं बना पाएगा और आगे की कोशिकाओं में बना नहीं रहेगा। इसलिए विकल्प B सही है। मार्कर जीन ori का कार्य नहीं कर सकता। परीक्षा टिप: क्लोनिंग वेक्टर के मुख्य घटकों को याद रखें—ori प्रतिकृति के लिए, selectable marker चयन के लिए और cloning site DNA insert करने के लिए। / The ori (origin of replication) is the sequence from which replication of a vector begins. A marker gene may help in selecting transformed cells, but without an ori the vector cannot replicate and be maintained stably in the host cell. Therefore, option B is correct. A marker gene cannot perform the function of an ori. Exam tip: Remember the key vector components—ori for replication, a selectable marker for selection, and a cloning site for insertion of DNA.
A. मार्कर जीन निष्क्रिय हो सकता है/The marker gene may become inactive
Explanation
Simple Explanation
जब विदेशी DNA का insert किसी marker gene के भीतर जुड़ता है, तो वह उस जीन के सामान्य अनुक्रम को बाधित कर सकता है। परिणामस्वरूप marker gene अपना कार्य नहीं कर पाता; इसे insertional inactivation कहते हैं। उदाहरण के लिए, lacZ gene में insert होने पर रंग-आधारित screening में recombinant colonies अलग दिखाई दे सकती हैं। परीक्षा टिप: marker gene के बीच में insert होने पर सामान्यतः gene disruption या inactivation सोचें। / When a foreign DNA insert is introduced within a marker gene, it can interrupt the normal gene sequence. Consequently, the marker gene may no longer function; this is called insertional inactivation. For example, insertion into the lacZ gene can help distinguish recombinant colonies in colour-based screening. Exam tip: if an insert enters the middle of a marker gene, think of gene disruption or inactivation.
B. प्लास्मिड में विदेशी DNA के प्रवेश से lacZ निष्क्रिय हुआ एक संभावित पुनर्संयोजक क्लोन/A potential recombinant clone in which foreign DNA insertion has disrupted lacZ
Explanation
Simple Explanation
नीले-सफेद चयन में lacZ के भीतर विदेशी DNA जुड़ने पर lacZ का कार्य बाधित हो सकता है। तब β-galactosidase नहीं बनता और X-gal का नीला उत्पाद नहीं बनता, इसलिए कॉलोनी सफेद दिखाई देती है। इसके विपरीत, lacZ सक्रिय होने पर सामान्यतः नीली कॉलोनी बनती है। परीक्षा टिप: सफेद कॉलोनी को संभावित recombinant मानें, लेकिन पुष्टि के लिए आगे screening या analysis आवश्यक हो सकता है। / In blue-white selection, insertion of foreign DNA within lacZ can disrupt lacZ function. As a result, β-galactosidase is not produced and X-gal is not converted into a blue product, so the colony appears white. In contrast, an active lacZ gene generally produces a blue colony. Exam tip: treat a white colony as a potential recombinant and remember that further screening or analysis may be needed for confirmation.
A. लक्ष्य डीएनए खंड के बिना पुनर्संयोजित-रहित वेक्टर/Non-recombinant vector without the target DNA insert
Explanation
Simple Explanation
नीले-सफेद चयन में यदि प्लास्मिड का lacZα क्षेत्र अक्षुण्ण रहता है, तो β-galactosidase बनता है और X-gal के अपघटन से कॉलोनी नीली दिखाई देती है। यह सामान्यतः बताता है कि लक्ष्य डीएनए खंड lacZ क्षेत्र में नहीं जुड़ा है, अर्थात वेक्टर पुनर्संयोजित-रहित है। इसके विपरीत, लक्ष्य डीएनए खंड के जुड़ने से lacZα बाधित होता है और कॉलोनी प्रायः सफेद बनती है। परीक्षा टिप: नीली कॉलोनी = lacZ सक्रिय = सामान्यतः insert अनुपस्थित। / In blue-white selection, an intact lacZα region allows production of functional β-galactosidase, which cleaves X-gal and produces a blue colony. Thus, a blue colony generally indicates that the target DNA insert has not been inserted into the lacZ region, so the vector is non-recombinant. In contrast, an insert disrupts lacZα and usually gives a white colony. Exam tip: blue colony = active lacZ = usually no insert.
A. Further screening या confirmation/Further screening or confirmation
Explanation
Simple Explanation
Antibiotic growth vector uptake दिखाता है। Insert की पुष्टि के लिए screening या analysis जरूरी हो सकता है। / Antibiotic growth shows vector uptake. Screening or analysis may be needed to confirm the insert.
A. Selection transformed cells चुनता है और screening recombinants पहचानती है/Selection chooses transformed cells and screening identifies recombinants
Explanation
Simple Explanation
Selection vector लेने वाली cells चुनती है। Screening insert वाले recombinants पहचानती है। / Selection chooses cells that received the vector. Screening identifies recombinants carrying the insert.
A. Ampicillin resistance देना/Giving ampicillin resistance
Explanation
Simple Explanation
ampR ampicillin resistance देता है। इससे transformed cells को ampicillin medium पर select किया जा सकता है। / ampR gives ampicillin resistance. It allows selection of transformed cells on ampicillin medium.
tetR tetracycline resistance से जुड़ा selectable marker है। इसे pBR322 के marker genes में याद रखें। / tetR is a selectable marker linked with tetracycline resistance. Remember it among pBR322 marker genes.
A. अधिक plasmid DNA मिल सकता है/More plasmid DNA can be obtained
Explanation
Simple Explanation
High copy number से प्रति cell plasmid copies बढ़ती हैं। इससे plasmid DNA yield अधिक हो सकती है। / High copy number increases plasmid copies per cell. This can give higher plasmid DNA yield.
pUC vectors lacZ आधारित blue-white screening से जुड़े होते हैं। यह recombinant screening का सरल example है। / pUC vectors are linked with lacZ-based blue-white screening. This is a simple example of recombinant screening.
A. Plant cell में DNA transfer/DNA transfer into plant cell
Explanation
Simple Explanation
T-DNA पौधे की कोशिका में transfer हो सकता है। modified Ti plasmid plant biotechnology में उपयोगी है। / T-DNA can be transferred into plant cells. Modified Ti plasmid is useful in plant biotechnology.
BAC large DNA fragments cloning के लिए useful है। इसे bacterial artificial chromosome के रूप में याद रखें। / BAC is useful for cloning large DNA fragments. Remember it as bacterial artificial chromosome.
YAC very large DNA inserts carry करने में उपयोगी हो सकता है। यह yeast artificial chromosome है। / YAC can be useful for carrying very large DNA inserts. It is yeast artificial chromosome.
Cosmid में lambda phage के cos sites शामिल होते हैं। यह packaging से जुड़ा vector feature है। / A cosmid includes cos sites from lambda phage. This is a vector feature linked with packaging.
Bacteriophage bacteria को infect करने वाला virus है। Modified phages cloning vectors के रूप में उपयोग हो सकते हैं। / A bacteriophage is a virus that infects bacteria. Modified phages can be used as cloning vectors.
BAC large inserts को carry करने में useful है। Simple plasmids आमतौर पर smaller inserts के लिए सुविधाजनक होते हैं। / BAC is useful for carrying large inserts. Simple plasmids are usually convenient for smaller inserts.
A. Resistance marker न होने से growth नहीं होगी/It will not grow because it lacks resistance marker
Explanation
Simple Explanation
Non-transformed cell में resistance marker नहीं होता। इसलिए antibiotic plate पर वह बढ़ नहीं सकती। / A non-transformed cell lacks the resistance marker. Therefore it cannot grow on an antibiotic plate.
Competent cells external DNA लेने के लिए तैयार होती हैं। Transformation में यह important step है। / Competent cells are prepared to take up external DNA. This is an important step in transformation.
A. Bacterial cells में plasmid entry में मदद/Helping plasmid enter bacterial cells
Explanation
Simple Explanation
Heat shock competent bacteria में plasmid uptake बढ़ाने के लिए प्रयोग किया जा सकता है। यह transformation method का हिस्सा है। / Heat shock can be used to increase plasmid uptake in competent bacteria. It is part of a transformation method.
Electroporation में electric pulse से cell membrane temporarily permeable हो सकती है। इससे DNA uptake बढ़ सकता है। / In electroporation an electric pulse can make the cell membrane temporarily permeable. This can increase DNA uptake.
A. Expected size का DNA fragment देखने के लिए/To see a DNA fragment of expected size
Explanation
Simple Explanation
Expected band insert की presence और size का संकेत दे सकता है। यह restriction analysis के बाद देखा जाता है। / An expected band can indicate insert presence and size. It is checked after restriction analysis.
A. Insert sequence और orientation/Insert sequence and orientation
Explanation
Simple Explanation
Sequencing insert का सही sequence और direction confirm कर सकती है। यह final confirmation में उपयोगी है। / Sequencing can confirm the correct sequence and direction of the insert. It is useful for final confirmation.
A. उसमें marker हो सकता है लेकिन insert नहीं/It may have marker but no insert
Explanation
Simple Explanation
Empty vector marker के कारण antibiotic पर बढ़ सकता है। लेकिन desired insert न होने से screening जरूरी है। / An empty vector can grow on antibiotic due to the marker. But screening is needed because it lacks the desired insert.
A. Vector insert के बिना बंद हो जाता है/Vector closes without insert
Explanation
Simple Explanation
Self-ligation में vector अपने ही सिरों से जुड़ जाता है। इससे desired recombinant clone नहीं बनता। / In self-ligation the vector joins its own ends. This does not form the desired recombinant clone.
Vector ends से phosphate हटाने पर self-ligation घट सकती है। यह background colonies कम करने में मदद करता है। / Removing phosphate from vector ends can reduce self-ligation. This helps reduce background colonies.
A. दो अलग ends से self-joining कठिन हो सकती है/Two different ends can make self-joining difficult
Explanation
Simple Explanation
दो अलग restriction ends vector के self-ligation को घटा सकते हैं। इससे desired insert cloning बेहतर हो सकती है। / Two different restriction ends can reduce vector self-ligation. This can improve desired insert cloning.
A. वेक्टर कितना डीएनए insert carry कर सकता है/How much DNA insert a vector can carry
Explanation
Simple Explanation
Insert capacity vector द्वारा carry किए जाने वाले DNA fragment के size से जुड़ी है। Different vectors की capacities अलग हो सकती हैं। / Insert capacity is related to the size of DNA fragment a vector can carry. Different vectors can have different capacities.
A. Insert size और experiment need/Insert size and experiment need
Explanation
Simple Explanation
Small inserts के लिए plasmid convenient हो सकता है और large inserts के लिए BAC useful हो सकता है। Vector choice insert size पर निर्भर हो सकती है। / A plasmid can be convenient for small inserts and BAC can be useful for large inserts. Vector choice can depend on insert size.
A. कई DNA fragments को vectors में store करना/Storing many DNA fragments in vectors
Explanation
Simple Explanation
Gene library में अनेक DNA fragments अलग-अलग vectors में cloned रखे जा सकते हैं। यह genome study में उपयोगी है। / In a gene library many DNA fragments can be cloned in different vectors. This is useful in genome study.
A. Genome fragments को clone और maintain करने के लिए/To clone and maintain genome fragments
Explanation
Simple Explanation
Genomic library में genome के DNA fragments vectors में रखे जाते हैं। इससे उनका अध्ययन और storage संभव होता है। / In a genomic library DNA fragments of the genome are kept in vectors. This allows study and storage.
A. mRNA से बने complementary DNA fragments/Complementary DNA fragments made from mRNA
Explanation
Simple Explanation
cDNA library में expressed genes से बने complementary DNA fragments clone किए जाते हैं। Vector इन fragments को carry करता है। / In a cDNA library complementary DNA fragments made from expressed genes are cloned. The vector carries these fragments.
Screening marker recombinants की पहचान में मदद करता है। lacZ based blue-white screening इसका example है। / A screening marker helps identify recombinants. lacZ-based blue-white screening is an example.
A. प्रतिकृति उद्गम (ori)/Origin of replication (ori)
Explanation
Simple Explanation
प्रतिकृति उद्गम (ori) वह विशिष्ट DNA अनुक्रम है जहाँ से vector DNA की प्रतिकृति शुरू होती है। इसलिए यह vector की प्रतियों के बनने और उसकी copy number को प्रभावित करने से सीधे जुड़ा होता है। चयननीय मार्कर transformant कोशिकाओं के चयन में काम आता है, प्रतिकृति शुरू कराने में नहीं। परीक्षा टिप: vector के मुख्य भागों में ori को replication, selectable marker को selection और restriction site को DNA insertion से जोड़कर याद रखें। / The origin of replication (ori) is the specific DNA sequence from which replication of vector DNA begins. Therefore, it is directly associated with formation of vector copies and can influence copy number. A selectable marker helps identify transformed cells; it does not initiate replication. Exam tip: Link ori with replication, selectable markers with selection, and restriction sites with insertion of foreign DNA.
Selectable marker transformed cells को select करने में direct मदद करता है। Antibiotic resistance marker इसका common example है। / A selectable marker directly helps select transformed cells. Antibiotic resistance marker is a common example.
Insert DNA cloning site या MCS में डाला जाता है। यही vector का designed insertion region है। / Insert DNA is placed into the cloning site or MCS. This is the designed insertion region of the vector.
A. Ori और selectable marker/Ori and selectable marker
Explanation
Simple Explanation
Ori replication कराता है और marker selection में मदद करता है। दोनों vector maintenance में उपयोगी हैं। / Ori allows replication and marker helps selection. Both are useful in vector maintenance.
Cloning vector का basic function foreign DNA carry करना है। यही gene cloning का first requirement है। / The basic function of a cloning vector is carrying foreign DNA. This is the first requirement of gene cloning.
A. Unwanted cutting हो सकती है/Unwanted cutting can occur
Explanation
Simple Explanation
Controlled cloning के लिए useful defined restriction sites चाहिए। Random cuts vector को नुकसान पहुँचा सकते हैं। / Controlled cloning needs useful defined restriction sites. Random cuts can damage the vector.
A. Replication selection और insertion को आसान बनाना/Making replication selection and insertion easy
Explanation
Simple Explanation
Vector design में ori marker और cloning site जैसे elements रखे जाते हैं। ये cloning को efficient बनाते हैं। / Vector design includes elements like ori marker and cloning site. These make cloning efficient.
Ti plasmid, Agrobacterium tumefaciens में पाया जाने वाला प्लास्मिड है और पौधों में जीन स्थानांतरण के लिए संशोधित करके उपयोग किया जाता है। इसका T-DNA भाग पादप कोशिका के जीनोम में प्रविष्ट कराया जा सकता है, इसलिए यह plant system के लिए सबसे उपयुक्त vector है। pBR322 मुख्यतः E. coli जैसे जीवाणुओं के लिए cloning vector है, जबकि λ phage vector भी सामान्यतः जीवाणु प्रणाली में प्रयुक्त होता है। परीक्षा टिप: पादप transformation के प्रश्न में Agrobacterium और Ti plasmid का संबंध याद रखें। / The Ti plasmid occurs in Agrobacterium tumefaciens and can be modified for gene transfer into plants. Its T-DNA region can be introduced into the plant genome, making it the most suitable vector for a plant system. In contrast, pBR322 is mainly a cloning vector for bacteria such as E. coli, and the λ phage vector is also generally used in bacterial systems. Exam tip: Associate plant transformation with Agrobacterium and the Ti plasmid.
pBR322 plasmid cloning vector का classic example है। इसे bacterial host में use किया जा सकता है। / pBR322 is a classic example of a plasmid cloning vector. It can be used in bacterial hosts.
A. Recombinant vector में insert होता है/Recombinant vector has insert
Explanation
Simple Explanation
Recombinant vector में desired insert DNA जुड़ा होता है। Empty vector में desired insert नहीं होता। / A recombinant vector has the desired insert DNA joined. An empty vector lacks the desired insert.
A. Vector DNA host cell में डाला जाता है/Vector DNA is introduced into a host cell
Explanation
Simple Explanation
Transformation में vector या recombinant DNA host cell में पहुँचाया जाता है। इसके बाद selection की जा सकती है। / In transformation vector or recombinant DNA is introduced into a host cell. Selection can be done afterward.
A. Vector cutting insert ligation transformation selection
Explanation
Simple Explanation
सामान्य cloning workflow में vector तैयार कर insert ligate करके host में transform किया जाता है। फिर selection और screening होती है। / In a common cloning workflow the vector is prepared insert is ligated and transformed into host. Then selection and screening occur.
Promoter transcription शुरू कराने में मदद करता है। यह expression vector में खास तौर पर जरूरी होता है। / A promoter helps start transcription. It is especially important in an expression vector.
A. जब केवल DNA copies चाहिए/When only DNA copies are needed
Explanation
Simple Explanation
Simple cloning vector DNA की copies बनाने के लिए useful है। Gene product चाहिए तो expression vector बेहतर हो सकता है। / A simple cloning vector is useful for making DNA copies. If gene product is needed an expression vector may be better.
A. Ori marker और cloning site वाला DNA vehicle/DNA vehicle with ori marker and cloning site
Explanation
Simple Explanation
Exam में cloning vector को DNA vehicle मानें जिसमें replication selection और insertion features हों। यही safest answer है। / In exams treat a cloning vector as a DNA vehicle with replication selection and insertion features. This is the safest answer.
Ori replication के लिए marker selection के लिए और MCS insertion के लिए है। इन तीनों को functions के साथ याद करें। / Ori is for replication marker is for selection and MCS is for insertion. Remember all three with functions.
