How does DNA ligase make the ends produced by restriction digestion permanent?Restriction digestion से बने DNA ends को ligase स्थायी रूप से कैसे जोड़ता है?
DNA ligase seals a break between adjacent nucleotides in a DNA strand by catalysing formation of a phosphodiester bond. After restriction digestion, compatible sticky ends can pair through hydrogen bonds, but that pairing is temporary and leaves discontinuities in the sugar-phosphate backbone. Ligase uses chemical energy to join the properly aligned 3′-hydroxyl and 5′-phosphate groups, producing a continuous DNA backbone. Consequently, option A is correct and explains how a recombinant molecule becomes covalently stable. Option B describes neither ligase function nor ordinary DNA joining, C is irrelevant to catalysis, and D may help reaction conditions but cannot create the permanent covalent link. The enzyme therefore completes the ligation step rather than cutting or copying DNA.DNA ligase DNA strand में पास-पास स्थित nucleotides के बीच टूटे हुए स्थान को भरते हुए phosphodiester bond बनाता है। Restriction digestion के बाद compatible sticky ends hydrogen bonds द्वारा अस्थायी रूप से जुड़ सकते हैं, परंतु sugar-phosphate backbone में discontinuity बनी रहती है। Ligase ऊर्जा का उपयोग करके सही दिशा में स्थित 3′-hydroxyl और 5′-phosphate groups को जोड़ता है और लगातार, covalently connected DNA backbone बना देता है। इसी कारण विकल्प A सही है और recombinant DNA स्थायी रूप से जुड़ जाता है। विकल्प B DNA को RNA में बदलने की बात करता है, जो ligase का कार्य नहीं है। विकल्प C enzyme को रंगने से संबंधित है और कोई molecular joining नहीं कराता। विकल्प D reaction mixture को प्रभावित कर सकता है, लेकिन phosphodiester bond नहीं बना सकता। अतः ligase cutting या copying नहीं, बल्कि DNA ends को seal करने का कार्य करता है।