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B. बिना restriction enzyme के डीएनए/DNA without restriction enzyme
Explanation
Simple Explanation
Negative control में वही DNA रखा जाता है, लेकिन restriction enzyme नहीं मिलाया जाता। इसलिए DNA कटता नहीं है और gel पर uncut DNA का band pattern मिलता है। इस pattern की तुलना enzyme-treated sample से करके पता चलता है कि bands में परिवर्तन वास्तव में restriction digestion के कारण हुआ है। केवल enzyme और buffer, पर DNA न होना, contamination जाँचने के लिए उपयोगी हो सकता है, लेकिन uncut DNA control नहीं है। परीक्षा टिप: restriction digestion का negative control सामान्यतः “DNA बिना enzyme” होता है। / In a negative control, the same DNA is kept without adding the restriction enzyme. Therefore, the DNA remains uncut and gives the band pattern of uncut DNA on the gel. Comparing this pattern with the enzyme-treated sample shows whether the change in bands is due to restriction digestion. A tube containing only enzyme and buffer but no DNA may help check contamination, but it is not the uncut-DNA control. Exam tip: the usual negative control for restriction digestion is “DNA without enzyme.”
A. enzyme काम कर रहा है या नहीं देखने के लिए/To check whether enzyme is working
Explanation
Simple Explanation
Known DNA substrate पर expected cut enzyme activity verify करता है। यह troubleshooting में useful है। / Expected cutting on a known DNA substrate verifies enzyme activity. This is useful in troubleshooting.
A. enzyme buffer या condition problem/Enzyme buffer or condition problem
Explanation
Simple Explanation
Positive control failure enzyme या reaction condition में problem दिखाता है। Buffer temperature और enzyme storage check करें। / Positive control failure indicates a problem with enzyme or reaction condition. Check buffer temperature and enzyme storage.
A. test DNA में site absent या methylated हो सकती है/Test DNA may lack site or be methylated
Explanation
Simple Explanation
Positive control enzyme activity दिखाता है। Test DNA में recognition site या methylation issue हो सकता है। / Positive control shows enzyme activity. Test DNA may have recognition site or methylation issue.
A. activity और expected digestion/Activity and expected digestion
Explanation
Simple Explanation
New batch की performance verify करना reliable results के लिए अच्छा practice है। Control digest उपयोगी है। / Verifying performance of a new batch is good practice for reliable results. Control digest is useful.
A. एंजाइम की गतिविधि घट सकती है/Enzyme activity can decrease
Explanation
Simple Explanation
Restriction enzyme एक निश्चित pH सीमा में सबसे प्रभावी ढंग से कार्य करता है। गलत pH एंजाइम की संरचना या उसके सक्रिय स्थल को प्रभावित कर सकता है, जिससे DNA का कटना कम हो जाता है या रुक सकता है। DNA की शुद्धता pH गलत होने से हमेशा नहीं बढ़ती। परीक्षा टिप: restriction digestion के लिए दिए गए buffer का सही pH और तापमान याद रखें। / A restriction enzyme works most effectively within a specific pH range. An incorrect pH can affect the enzyme's structure or active site, reducing or even preventing DNA cleavage. Incorrect pH does not automatically increase DNA purity. Exam tip: remember that the recommended buffer provides the correct pH and conditions for restriction digestion.
A. यह एंजाइम की DNA से binding, activity और specificity को प्रभावित कर सकता है/It can affect the enzyme's binding to DNA, activity, and specificity
Explanation
Simple Explanation
Salt concentration restriction enzyme और DNA के बीच ionic interactions को प्रभावित करती है। बहुत कम या बहुत अधिक salt होने पर एंजाइम की activity घट सकती है और कुछ स्थितियों में वह अपने recognition site के अतिरिक्त स्थानों पर भी कट लगा सकता है (star activity)। इसलिए निर्माता द्वारा सुझाया गया buffer उपयोग करना चाहिए। परीक्षा टिप: restriction enzyme के लिए सही buffer में salt, pH और Mg²⁺ जैसे आवश्यक घटक होते हैं। / Salt concentration affects the ionic interactions between a restriction enzyme and DNA. Too little or too much salt can reduce enzyme activity and, under some conditions, may cause cutting at sites other than the recognition sequence (star activity). Therefore, the manufacturer-recommended buffer should be used. Exam tip: a proper restriction-enzyme buffer provides suitable salt, pH, and essential components such as Mg²⁺.
A. एंजाइम की सक्रियता और स्थिरता बनाए रखने के लिए/To preserve enzyme activity and stability
Explanation
Simple Explanation
Restriction enzyme प्रोटीन होते हैं और अधिक तापमान पर उनकी संरचना बदल सकती है या उनकी सक्रियता कम हो सकती है। इन्हें बर्फ पर रखने से कटाई की अभिक्रिया शुरू करने तक एंजाइम स्थिर और सक्रिय रहता है। डीएनए का amplification PCR से किया जाता है, restriction enzyme से नहीं। परीक्षा टिप: DNA को काटने वाले एंजाइमों को सामान्यतः ठंडा रखा जाता है। / Restriction enzymes are proteins whose structure or activity may be reduced at higher temperatures. Keeping them on ice helps maintain enzyme stability and activity until the digestion reaction is started. DNA amplification is done by PCR, not by a restriction enzyme. Exam tip: Enzymes used for cutting DNA are generally kept cold during setup.
A. DNA और enzyme evenly mix करने के लिए without shearing/To mix DNA and enzyme evenly without shearing
Explanation
Simple Explanation
Gentle mixing reaction components मिलाता है और DNA damage से बचाता है। Harsh vortexing avoid करें। / Gentle mixing combines reaction components and avoids DNA damage. Avoid harsh vortexing.
A. DNA ligase तभी efficient joining कर पाएगा/DNA ligase can then join efficiently
Explanation
Simple Explanation
Compatible ends base pairing और ligation को आसान बनाते हैं। Incompatible ends cloning failure दे सकते हैं। / Compatible ends make base pairing and ligation easier. Incompatible ends can cause cloning failure.
