What can be a challenge in large-fragment purification after restriction digest?Restriction digest के बाद बड़े DNA fragment को purify करने में कौन-सी चुनौती आ सकती है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: Shearing and low recoveryShearing and low recovery
The governing concept is that high-molecular-weight DNA is mechanically fragile during electrophoresis, band excision, and purification. Large fragments can be sheared by repeated pipetting, vortexing, narrow tips, or excessive handling. They may also enter a gel slowly, remain partly trapped in the well, or be recovered inefficiently during extraction. These effects reduce the amount of intact DNA available for later ligation or analysis. Thus option A is correct: shearing and low recovery are realistic purification problems. Large DNA does not turn into protein, and a restriction digest does not imply that DNA is absent. Enzyme colour is not a meaningful determinant of purification success. Gentle mixing, suitable agarose concentration, careful loading, and minimized exposure to damaging conditions improve recovery.मुख्य अवधारणा यह है कि उच्च आणविक भार वाले बड़े DNA molecules electrophoresis, band काटने और purification के दौरान यांत्रिक रूप से आसानी से टूट सकते हैं। बार-बार pipetting, vortexing, पतली tip या अधिक handling से DNA में shearing हो सकती है। बड़े fragments gel में धीरे चल सकते हैं, well में आंशिक रूप से फँस सकते हैं या extraction के समय कम मात्रा में elute हो सकते हैं। इससे intact DNA की recovery घटती है और आगे ligation या analysis प्रभावित हो सकता है। इसलिए विकल्प A सही है, क्योंकि shearing और low recovery वास्तविक चुनौतियाँ हैं। DNA protein में नहीं बदलता, digest के बाद DNA का अनुपस्थित होना आवश्यक नहीं है और enzyme का रंग purification की सफलता तय नहीं करता।
Student feedback
Was this question useful?
👍 0 Helpful 👎 0 Not helpful
Yes 0% No 0%
0 responsesStudent Reviews
No published reviews yet.
