Why should very harsh mixing be avoided during alkaline lysis?क्षारीय लाइसिस के दौरान बहुत तेज़ मिश्रण से क्यों बचना चाहिए?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: To keep chromosomal DNA contamination lowगुणसूत्रीय डीएनए का संदूषण कम रखने के लिए
Alkaline lysis separates plasmid DNA from cellular material by using detergent and alkaline conditions, followed by neutralization. Plasmid DNA is small and circular, so it can often re-form correctly, whereas long chromosomal DNA is fragile and easily sheared. Vigorous vortexing or rough pipetting breaks chromosomal DNA into smaller pieces that remain in the solution and may contaminate the plasmid preparation. Gentle inversion mixes the reagents while limiting this shearing. Therefore option D is correct; the other choices do not explain the purpose of gentle handling.क्षारीय लाइसिस में डिटर्जेंट और क्षारीय परिस्थितियों के बाद उदासीनीकरण द्वारा प्लाज़्मिड डीएनए को कोशिकीय पदार्थ से अलग किया जाता है। छोटा, वृत्ताकार प्लाज़्मिड डीएनए अपेक्षाकृत सही रूप में पुनर्गठित हो सकता है, लेकिन लंबा गुणसूत्रीय डीएनए बहुत नाज़ुक होता है और आसानी से टूटता है। तेज़ वॉर्टेक्सिंग या कठोर पिपेटिंग से गुणसूत्रीय डीएनए छोटे टुकड़ों में टूटकर विलयन में रह सकता है और प्लाज़्मिड तैयारी को दूषित कर सकता है। इसलिए धीरे-धीरे उलटना, अर्थात gentle inversion, उचित है। बाकी विकल्प इस सावधानी का कारण नहीं बताते।
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