If DNA concentration is very high, how can it be used further in PCR?यदि DNA की concentration बहुत अधिक हो, तो उसे आगे PCR में कैसे उपयोग किया जा सकता है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: By preparing an appropriate dilutionBy preparing an appropriate dilution
PCR requires a suitable amount of template DNA, not simply the highest possible concentration. An excessively concentrated template may introduce too much genomic DNA, salts, or other substances into the reaction and can reduce amplification quality or promote nonspecific products. The concentration should first be estimated, then a measured aliquot should be diluted with an appropriate nuclease-free buffer or water to obtain a working concentration. Option A is correct because dilution preserves the DNA while making its input controllable and reproducible. Adding DNA blindly can inhibit or unbalance the reaction; drying and discarding wastes the sample, while ethanol is used for precipitation or storage steps, not as the normal PCR template medium.PCR में template DNA की उचित मात्रा चाहिए, केवल अधिक-से-अधिक concentration नहीं। बहुत concentrated DNA डालने पर reaction में genomic DNA, salts या अन्य अवांछित पदार्थों की मात्रा बढ़ सकती है। इससे amplification कमजोर हो सकता है या nonspecific products बन सकते हैं। इसलिए पहले concentration का अनुमान लगाया जाता है और फिर nuclease-free water या उपयुक्त buffer से measured dilution बनाकर working concentration तैयार की जाती है। विकल्प A सही है, क्योंकि dilution से DNA सुरक्षित रहता है और reaction में डाली जाने वाली मात्रा नियंत्रित तथा reproducible बनती है। बिना मापे बहुत DNA डालना inhibitory हो सकता है; DNA को सुखाकर फेंकना अनावश्यक है और ethanol PCR template के सामान्य माध्यम के रूप में उपयोग नहीं किया जाता।
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