If a DNA sample has RNA contamination what is generally the main effect on restriction digestion?यदि DNA sample में RNA contamination हो तो restriction digestion पर सामान्यतः सबसे बड़ा effect क्या होगा?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: Accurate DNA quantification can be confusedaccurate DNA quantification confuse हो सकती है
The governing concept is interference with sample measurement and composition. RNA also absorbs ultraviolet light near 260 nm, so a mixed DNA-RNA preparation can give an inflated or misleading estimate of nucleic-acid concentration. If the operator assumes that all measured material is DNA, the amount of DNA added to the restriction reaction may be miscalculated, affecting enzyme-to-substrate balance and interpretation. Therefore option B is the best answer. RNA contamination does not mean that a DNA restriction enzyme will completely cut RNA, and it cannot make a gel permanently fail. Restriction enzymes cut specific DNA recognition sites; they do not join DNA. RNase treatment or an appropriate cleanup can improve the sample before digestion.यहाँ मुख्य अवधारणा sample composition और उसकी measurement में होने वाला interference है। RNA भी 260 nm के आसपास ultraviolet light absorb करता है। इसलिए DNA-RNA मिश्रण में absorbance या कुल nucleic-acid measurement, वास्तविक DNA मात्रा से अधिक या भ्रामक दिखाई दे सकती है। यदि प्रयोगकर्ता मापी गई पूरी मात्रा को DNA मान ले, तो restriction reaction में DNA की सही मात्रा नहीं डाली जाएगी और enzyme तथा substrate का अनुपात प्रभावित हो सकता है। इसलिए विकल्प B सबसे उपयुक्त है। RNA contamination का अर्थ यह नहीं कि restriction enzyme पूरी तरह RNA काट देगा; इससे gel स्थायी रूप से बंद भी नहीं होता। Restriction enzyme विशिष्ट DNA recognition sites पर cleavage करता है और DNA को जोड़ता नहीं है। RNase treatment या उचित cleanup से digestion से पहले sample सुधारा जा सकता है।
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