What strategy can separate very close fragment sizes in restriction digest?Restriction digest में very close fragment sizes को अलग करने के लिए क्या strategy हो सकती है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: Longer run and suitable agarose percentagelonger run और suitable agarose percentage
The direct answer is A: use a longer run and a suitable agarose percentage. DNA fragments that differ only slightly in size may travel almost together under ordinary conditions. Gel resolution can improve when the agarose concentration is selected for the expected size range and electrophoresis is allowed to run sufficiently long at suitable conditions. Option A is correct because both gel percentage and run time affect separation and band resolution. Option B is wrong because boiling can denature or destroy the restriction enzyme and will not separate bands. Option C is wrong because DNA does not become protein during electrophoresis. Option D is wrong because a ladder is needed to estimate fragment sizes; removing it does not improve the actual separation. Also avoid overloading the sample.सीधा उत्तर A है: longer run और suitable agarose percentage का उपयोग करना। जिन DNA fragments के आकार में बहुत कम अंतर हो, वे सामान्य gel conditions में पास-पास चल सकते हैं। Expected size range के अनुसार agarose concentration चुनने और electrophoresis को पर्याप्त समय तक चलाने से bands के बीच resolution बेहतर हो सकती है। विकल्प A सही है क्योंकि agarose percentage और run time दोनों separation को प्रभावित करते हैं। विकल्प B गलत है क्योंकि enzyme को boil करने से वह denature या inactive हो सकता है और bands अलग नहीं होंगे। विकल्प C गलत है क्योंकि electrophoresis के दौरान DNA protein में नहीं बदलता। विकल्प D गलत है क्योंकि ladder fragment size का अनुमान लगाने के लिए जरूरी है; उसे हटाने से separation बेहतर नहीं होती। Sample अधिक मात्रा में न डालें। याद रखें: close bands के लिए gel condition optimize करें, enzyme को न उबालें।
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