How is recombinant DNA formed before the next transformation step after restriction digestion?Restriction digestion के बाद next transformation step से पहले recombinant DNA कैसे बनता है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: By joining cut vector and insert with ligasecut vector और insert को ligase से जोड़कर
Direct answer: Option A, join the cut vector and insert with DNA ligase. Restriction enzymes create compatible ends, such as matching sticky ends or suitable blunt ends. These ends bring the two DNA pieces together, but stable joining requires phosphodiester bonds in the sugar-phosphate backbone. DNA ligase catalyses that joining, producing recombinant DNA before transformation into a host cell. Option A is correct. Option B is wrong: heating DNA does not specifically join the pieces and may damage DNA. Option C is wrong: staining an enzyme cannot create a recombinant molecule. Option D is wrong: freezing a gel neither joins DNA nor prepares it for transformation. The sequence is cut, purify if needed, ligate, then transform and screen. Memory cue: restriction enzyme cuts; ligase seals.सीधा उत्तर: विकल्प A, cut vector और insert को DNA ligase से जोड़कर recombinant DNA बनाया जाता है। Restriction enzymes compatible ends बनाते हैं, जैसे matching sticky ends या उपयुक्त blunt ends। ये ends DNA pieces को पास लाते हैं, लेकिन sugar-phosphate backbone में स्थायी phosphodiester bonds बनाने के लिए DNA ligase चाहिए। इसी joining के बाद recombinant DNA बनता है, जिसे आगे host cell में transform किया जा सकता है। विकल्प A सही है। विकल्प B गलत है, क्योंकि केवल DNA गर्म करने से pieces विशेष रूप से नहीं जुड़ते और DNA को नुकसान हो सकता है। विकल्प C गलत है, क्योंकि enzyme को stain करने से recombinant molecule नहीं बनता। विकल्प D गलत है, क्योंकि gel freeze करने से DNA join नहीं होता। क्रम याद रखें: cut, आवश्यक हो तो purify, ligate, फिर transform और screen।
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