Why should ethanol carryover be avoided in restriction digest purification?Restriction digest purification में ethanol carryover क्यों avoid करना चाहिए?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: Ligation and enzyme-based reactions may be inhibitedलिगेशन और एंजाइम-आधारित अभिक्रियाएँ बाधित हो सकती हैं
Residual ethanol in purified DNA can reduce the activity of DNA ligase and other enzymes. Therefore, DNA containing ethanol carryover may give poor results in ligation, PCR, or other downstream enzyme-based reactions. Ethanol carryover does not make DNA more visible or cause a gel to run on its own. Exam tip: Avoid over-drying the DNA pellet as well, because an excessively dry pellet can be difficult to dissolve.शुद्ध किए गए DNA में बचा हुआ ethanol, ligase तथा अन्य एंजाइमों की गतिविधि को कम कर सकता है। इसलिए ऐसा DNA लिगेशन, PCR या अन्य downstream एंजाइम अभिक्रियाओं में खराब परिणाम दे सकता है। DNA का रंग बदलना या gel का अपने-आप चलना ethanol carryover के प्रभाव नहीं हैं। परीक्षा टिप: DNA pellet को अधिक सुखाने से भी बचें, क्योंकि अत्यधिक सूखा pellet पुनः घोलना कठिन हो सकता है।
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