For ligating a dephosphorylated vector what should the insert have?Dephosphorylated vector को ligate करने के लिए insert में क्या होना चाहिए?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: phosphate group / Phosphate groupphosphate group / Phosphate group
DNA ligase joins DNA fragments by forming a phosphodiester bond between a 3′-hydroxyl group and a 5′-phosphate group. When a vector is dephosphorylated, its 5′ phosphate groups have been removed. This prevents the vector ends from easily joining to each other and reduces self-ligation during cloning.
For the insert to be joined to the dephosphorylated vector, the insert must provide suitable 5′ phosphate groups. Ligase can then make the strand connection, although the resulting molecule may initially contain a nick that is repaired inside a host cell. Thus, the required feature is a phosphate group, so option A is correct; protein or ethanol cannot replace the DNA phosphate needed for ligation.डीएनए लाइगेज, डीएनए के 3′ हाइड्रॉक्सिल और 5′ फॉस्फेट समूह के बीच फॉस्फोडाइएस्टर बंध बनाकर टुकड़ों को जोड़ता है। वेक्टर को डीफॉस्फोराइलेट करने पर उसके 5′ फॉस्फेट हटा दिए जाते हैं। इससे वेक्टर के दोनों सिरों का आपस में जुड़ना कम होता है और स्व-लिगेशन नियंत्रित किया जाता है।
डीफॉस्फोराइलेटेड वेक्टर से जुड़ने के लिए इंसर्ट में उपयुक्त 5′ फॉस्फेट समूह होना चाहिए। लाइगेज इस आधार पर जोड़ बना सकता है; प्रारम्भ में बने निक को कोशिका बाद में भर सकती है। इसलिए विकल्प A सही है। प्रोटीन या एथेनॉल डीएनए के आवश्यक फॉस्फेट का स्थान नहीं ले सकते।
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