Why can sequencing be useful after restriction digest?Sequencing restriction digest के बाद क्यों useful हो सकती है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: To confirm exact insert sequenceexact insert sequence confirm करने के लिए
Direct answer: Option A, sequencing can confirm the exact insert sequence. A restriction digest mainly answers questions such as whether fragments have expected sizes and whether selected sites were cut. A band of the expected length does not prove that every base is correct; a small mutation, deletion, insertion, or rearrangement may remain hidden. Sequencing reads the nucleotide order and can verify the insert and its junctions more directly. Option A is correct because it provides sequence-level confirmation after the preliminary digest check. Option B is wrong: sequencing is not used to colour an enzyme. Option C is wrong: it does not stop a gel. Option D is wrong: water cannot be changed into DNA by sequencing. The logical chain is digest for approximate structure, then sequencing for exact bases. Memory cue: size check is not sequence check.सीधा उत्तर: विकल्प A, sequencing exact insert sequence की पुष्टि कर सकती है। Restriction digest सामान्यतः यह बताता है कि fragments का आकार अपेक्षित है या चुने हुए restriction sites कटे हैं। लेकिन सही आकार का band यह सिद्ध नहीं करता कि DNA का हर base सही है; छोटी mutation, deletion, insertion या rearrangement छिप सकती है। Sequencing nucleotide order पढ़कर insert और उसके junctions की अधिक सीधी पुष्टि करती है। इसलिए digest प्रारम्भिक जाँच है और sequencing sequence-level final confirmation देती है। विकल्प B गलत है, क्योंकि sequencing enzyme को रंगने के लिए नहीं होती। विकल्प C गलत है, क्योंकि इससे gel बंद नहीं होती। विकल्प D गलत है, क्योंकि पानी sequencing द्वारा DNA नहीं बनता। याद रखें: band size जाँच है, exact sequence जाँच नहीं।
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