How can insert size be confirmed by restriction digest?Restriction digest से insert size कैसे confirm किया जा सकता है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: By cutting with flanking enzymes and observing expected bandflanking enzymes से cut करके expected band देखकर
The governing concept is fragment-size analysis after diagnostic restriction digestion. Digesting a recombinant vector with enzymes that cut on either side of the insert releases that insert as a separate DNA fragment. When the products are separated by agarose gel electrophoresis, the insert band is compared with a DNA ladder of known fragment sizes. A band at the expected approximate length supports the proposed insert size; the vector band provides an additional consistency check. Therefore option A is correct. Smelling the sample gives no size information, freezing the enzyme does not measure DNA, and adding water alone cannot release or identify a fragment.यहाँ मुख्य अवधारणा diagnostic restriction digest के बाद fragment-size analysis है। यदि ऐसे enzymes चुने जाएँ जो insert के दोनों ओर काटते हैं, तो digestion insert को vector से अलग DNA fragment के रूप में छोड़ सकता है। Agarose gel electrophoresis में fragments अलग होने के बाद insert band की स्थिति को ज्ञात आकार वाले DNA ladder से मिलाया जाता है। Expected length के पास band मिलना insert size के दावे का समर्थन करता है और vector band अतिरिक्त नियंत्रण देता है। इसलिए विकल्प A सही है। Sample को सूँघने से DNA का आकार नहीं पता चलता, enzyme को freeze करने से measurement नहीं होती और केवल पानी मिलाने से fragment न तो release होगा, न पहचाना जा सकेगा।
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