What is the risk of too much enzyme in restriction digestion?Restriction digestion में too much enzyme का risk क्या है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: Star activity, i.e. cleavage at non-specific sitesस्टार गतिविधि, अर्थात गैर-विशिष्ट स्थलों पर कटना
Using too much restriction enzyme, especially when it raises the final glycerol concentration, can reduce enzyme specificity. This causes star activity, in which DNA may be cut at sites similar to, but different from, the intended recognition sequence. Complete failure of cutting is more commonly associated with too little enzyme, an incorrect buffer, or unsuitable incubation conditions. Exam tip: link excess restriction enzyme with non-specific cleavage or star activity.Restriction enzyme की बहुत अधिक मात्रा डालने पर, विशेषकर जब अंतिम glycerol concentration बढ़ जाए, enzyme की specificity कम हो सकती है। इससे star activity होती है और DNA अपेक्षित recognition site के अलावा मिलते-जुलते गैर-विशिष्ट स्थलों पर भी कट सकता है। DNA का न कटना आमतौर पर enzyme की कमी, गलत buffer या अनुचित incubation से जुड़ा होता है। परीक्षा टिप: excess restriction enzyme का मुख्य जोखिम याद रखें—non-specific cleavage (star activity)।
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