Which DNA purity issue can be very problematic for restriction enzyme reaction?Restriction enzyme reaction के लिए DNA purity का कौन सा issue सबसे problematic हो सकता है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: Phenol ethanol or salt carryoverphenol ethanol या salt carryover
The direct answer is option A: carryover of phenol, ethanol, or excess salts can seriously interfere with a restriction enzyme reaction. DNA purification chemicals are useful during extraction, but traces left in the final DNA preparation may inhibit the enzyme or disturb the reaction conditions. Phenol can damage proteins, ethanol can interfere when present in excess, and salts can change ionic strength or enzyme performance. Option A is correct because these contaminants can produce weak, incomplete, or absent digestion even when the DNA sequence is suitable. Option B is wrong because a label on the DNA tube does not chemically inhibit the enzyme; it is needed for identification. Option C is wrong because tube shape is not normally the relevant purity problem. Option D is wrong because a gel photograph is made after the reaction and cannot contaminate the reaction mixture. Before digestion, use clean DNA, remove wash solvent properly, and avoid carrying unnecessary salts into the reaction. If needed, cleanup or dilution can help, but dilution must not reduce DNA below a useful concentration. Memory cue: clean DNA gives the enzyme a clean reaction environment.सीधा उत्तर विकल्प A है: phenol, ethanol या अधिक salts का carryover restriction enzyme reaction में गंभीर बाधा डाल सकता है। DNA purification में ये chemicals उपयोगी हो सकते हैं, लेकिन अंतिम DNA preparation में उनके traces रह जाएँ तो enzyme inhibit हो सकता है या reaction conditions बदल सकती हैं। Phenol proteins को नुकसान पहुँचा सकता है, excess ethanol enzyme के काम में बाधा डाल सकता है और salts ionic strength तथा enzyme performance बदल सकते हैं। विकल्प A सही है, क्योंकि ऐसे contaminants के कारण digestion कमजोर, अधूरा या बिल्कुल न होने वाला हो सकता है। विकल्प B गलत है; tube पर लगा label enzyme को रासायनिक रूप से inhibit नहीं करता, बल्कि sample पहचानने के लिए जरूरी है। विकल्प C गलत है; सामान्यतः tube का आकार purity समस्या नहीं है। विकल्प D गलत है; gel photograph reaction के बाद बनती है और reaction mixture को contaminate नहीं करती। Digest से पहले clean DNA लें, wash solvent को अच्छी तरह हटाएँ और अनावश्यक salts न लाएँ। जरूरत पर cleanup या dilution मदद कर सकता है, पर dilution से DNA concentration बहुत कम नहीं होनी चाहिए। याद रखें: clean DNA enzyme के लिए साफ reaction environment देता है।
Student feedback
Was this question useful?
👍 0 Helpful 👎 0 Not helpful
Yes 0% No 0%
0 responsesStudent Reviews
No published reviews yet.