Why are two different restriction enzymes useful in directional cloning?Directional cloning में दो अलग restriction enzymes उपयोगी क्यों होते हैं?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: To control the orientation of the inserted DNATo control the orientation of the inserted DNA
The governing concept is directional cloning through non-identical DNA ends. When two different restriction enzymes cut the vector and insert at selected sites, the two ends are usually non-compatible with one another. The insert can therefore pair with the vector only in the intended arrangement, rather than entering in either forward or reverse orientation. This greatly reduces incorrectly oriented clones and may also prevent vector self-ligation. Option C is correct because the different ends impose orientation control. Option A is wrong because the DNA is preserved, not destroyed; option B is unrelated to restriction digestion; and option D concerns fermentation, not molecular cloning.इसका मुख्य सिद्धान्त अलग-अलग restriction enzymes से बनने वाले non-identical DNA ends का उपयोग है। जब vector और insert को चुनी हुई sites पर दो अलग enzymes से काटा जाता है, तो बने हुए दोनों ends सामान्यतः एक-दूसरे के साथ compatible नहीं होते। इसलिए insert vector में केवल निर्धारित दिशा में जुड़ने की अधिक संभावना रखता है, forward या reverse दोनों दिशाओं में नहीं। इससे गलत orientation वाले clones कम होते हैं और vector के स्वयं जुड़ने की संभावना भी घट सकती है। इसलिए विकल्प C सही है। विकल्प A DNA नष्ट करने, B protein हटाने और D fermentation से संबंधित हैं, directional cloning से नहीं।
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