DNA isolation से आए EDTA का restriction digestion पर क्या असर हो सकता है?
What effect can EDTA from DNA isolation have on restriction digestion?
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A. यह \(Mg^{2+}\) को chelate करके restriction enzyme की गतिविधि घटा सकता हैIt can chelate \(Mg^{2+}\) and reduce restriction enzyme activity
Simple Explanation
EDTA एक chelating agent है, जो \(Mg^{2+}\) जैसे द्विसंयोजी धातु आयनों को बाँध लेता है। अधिकांश restriction enzymes को DNA काटने के लिए \(Mg^{2+}\) cofactor की आवश्यकता होती है; इसलिए EDTA की उपस्थिति में enzyme की गतिविधि कम हो सकती है या digestion रुक सकता है। EDTA DNA का recognition sequence नहीं बदलता। परीक्षा टिप: restriction digestion असफल होने पर DNA sample में EDTA contamination और reaction buffer में \(Mg^{2+}\) की उपलब्धता जाँचें। / EDTA is a chelating agent that binds divalent metal ions such as \(Mg^{2+}\). Most restriction enzymes require \(Mg^{2+}\) as a cofactor to cut DNA, so residual EDTA can reduce enzyme activity or prevent digestion. EDTA does not alter the DNA recognition sequence. Exam tip: if restriction digestion fails, consider EDTA contamination and check the availability of \(Mg^{2+}\) in the reaction buffer.
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