If the desired fragment is not unique in a restriction digest, what is an appropriate strategy?यदि restriction digest में desired fragment unique न हो, तो कौन-सी strategy उपयुक्त हो सकती है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: Choose alternative enzymes or use a gel-purification strategy that separates the desired fragmentChoose alternative enzymes or use a gel-purification strategy that separates the desired fragment
A fragment is not unique when the same or a very similar-sized band can arise from more than one DNA segment. In that situation, a band at the expected size alone may not prove that the desired construct has been obtained. One solution is to select a different restriction enzyme or enzyme combination that creates a more distinctive pattern. Another is to separate fragments on a sufficiently resolved agarose gel, excise the correct band, and verify it with additional digestion, PCR, sequencing, or another suitable method. Option A is correct because it improves discrimination. Ignoring the ambiguity risks cloning the wrong fragment, while smelling an enzyme or converting DNA into protein has no diagnostic role.जब एक ही या लगभग समान आकार का band एक से अधिक DNA segments से बन सकता है, तब fragment unique नहीं माना जाता। ऐसी स्थिति में केवल expected size का band मिलना यह सिद्ध नहीं करता कि desired construct ही प्राप्त हुआ है। एक उपाय है कि alternative restriction enzyme या enzyme combination चुना जाए, जिससे अधिक अलग और स्पष्ट fragment pattern मिले। दूसरा उपाय है कि बेहतर resolution वाले agarose gel पर fragments अलग किए जाएं, सही band काटकर purify किया जाए और फिर अतिरिक्त digestion, PCR, sequencing या किसी अन्य उपयुक्त method से पुष्टि की जाए। इसलिए option A सही है। अस्पष्ट result को ignore करने से गलत fragment clone हो सकता है; enzyme को smell करना या DNA को protein में बदलना पहचान की कोई वैज्ञानिक strategy नहीं है।
Student feedback
Was this question useful?
👍 0 Helpful 👎 0 Not helpful
Yes 0% No 0%
0 responsesStudent Reviews
No published reviews yet.
