When can ligation efficiency be higher?Ligation efficiency कब अधिक हो सकती है?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: When compatible sticky ends are presentWhen compatible sticky ends are present
The governing concept is complementary-end pairing before enzymatic sealing. Compatible sticky ends contain complementary single-stranded overhangs, so they can hydrogen-bond with one another and temporarily hold the DNA fragments in the correct alignment. This increases the local concentration and correct orientation of the 3′-OH and 5′-phosphate groups, allowing ligase to form the phosphodiester bond more efficiently. Therefore option A is correct. Boiling usually denatures the protein enzyme, absence of an energy source prevents or reduces ligation chemistry, and incompatible ends cannot pair properly. Blunt ends may also be ligated, but they generally require more favourable conditions and are often less efficient than compatible sticky ends.यह प्रश्न enzymatic sealing से पहले complementary ends के pairing की अवधारणा पर आधारित है। Compatible sticky ends में एक-दूसरे के पूरक single-stranded overhangs होते हैं। वे hydrogen bonds बनाकर DNA fragments को सही alignment में अस्थायी रूप से पकड़ लेते हैं। इससे 3′-OH और 5′-फॉस्फेट समूह सही दिशा में और पास आ जाते हैं, इसलिए ligase के लिए phosphodiester bond बनाना अधिक प्रभावी हो सकता है। अतः विकल्प A सही है। उबालने से सामान्यतः protein enzyme denature हो जाता है, ऊर्जा स्रोत न होने पर ligation घटती या रुकती है, और incompatible ends ठीक से pair नहीं कर पाते। Blunt ends भी जुड़ सकते हैं, पर अक्सर अधिक अनुकूल परिस्थितियाँ चाहिए होती हैं।
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