Why are two different ends made in a vector during directional cloning?Directional cloning में vector के दो अलग ends क्यों बनाए जाते हैं?
Answer and explanationउत्तर और व्याख्या
Correct answer:सही उत्तर: To join insert in correct orientationInsert को सही दिशा में जोड़ने के लिए
The direct answer is option A: two different ends help the insert join in the correct orientation. In directional cloning, the vector and the insert are cut with two different restriction enzymes. Each enzyme recognizes a particular DNA sequence and creates a particular end. Because the two ends are not identical, one end of the insert fits only one end of the vector, and the other insert end fits the other vector end. This greatly reduces reverse insertion and helps place the gene in the intended direction, which is especially important when expression depends on a promoter. Option A is correct. Option B is wrong because DNA is not changed directly into protein by making different restriction ends; protein production requires transcription and translation. Option C is wrong because the host cell is not removed by directional cloning. Option D is wrong because markers do not become water; markers help select or screen cells. The two-end method does not guarantee every molecule is perfect, but it strongly favors the desired orientation. Memory cue: two different ends act like two different connectors, allowing only the planned direction.सीधा उत्तर विकल्प A है: दो अलग ends insert को सही orientation में जोड़ने में सहायता करते हैं। Directional cloning में vector और insert को दो अलग restriction enzymes से काटा जाता है। प्रत्येक enzyme एक विशेष DNA sequence पहचानकर विशेष प्रकार का end बनाता है। इसलिए insert का एक सिरा vector के केवल एक विशेष सिरे से जुड़ता है और दूसरा सिरा दूसरे सिरे से। इससे insert के उलटी दिशा में लगने की संभावना बहुत कम हो जाती है। यह तब बहुत महत्वपूर्ण है जब gene को promoter के अनुसार सही दिशा में पढ़वाकर expression कराना हो। विकल्प A सही है। विकल्प B गलत है, क्योंकि अलग restriction ends बनाने से DNA सीधे protein में नहीं बदलता; protein बनने के लिए transcription और translation आवश्यक हैं। विकल्प C गलत है, क्योंकि directional cloning का उद्देश्य host को हटाना नहीं है। विकल्प D गलत है, क्योंकि marker पानी में नहीं बदलता; marker selection या screening में सहायता करता है। यह विधि सही दिशा की संभावना बढ़ाती है, हालांकि हर molecule के सही बनने की गारंटी नहीं देती। याद रखें: दो अलग ends दो अलग connectors जैसे होते हैं और insert को योजनाबद्ध दिशा में लगाते हैं।
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